講解如何使用DNA合成儀合成亞磷酰胺寡核苷酸
更新時間：2022-03-09 點擊次數(shù)：1147
DNA合成儀就是用于和DNA或RNA結(jié)構(gòu)類似的寡核苷酸合成的自動化儀器，通常用于固相合成法，每次在長的寡核苷酸鏈上接入一個核苷酸。加入每一個核苷酸均通過相同的化學(xué)反應(yīng)和相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。
以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例，假如要使用DNA合成儀合成亞磷酰胺寡核苷酸，你就得按規(guī)范來：
1、首先對合成儀上所有試劑瓶中的試劑量認真檢查。
2、然后在合成儀上裝上標記好的干凈的收集瓶。在合成儀中輸入要合成的DNA序列。對選擇的合成步驟進行檢查。
3、選擇結(jié)束方法：儀器的原始狀態(tài)為TritylOffAuto，如果想要通過5，—DMT基團連接純化寡核苷酸，那么將其轉(zhuǎn)變?yōu)門ritylOnAuto結(jié)束狀態(tài)。選擇結(jié)束方法通常是為系統(tǒng)的原始狀態(tài)。
4、將你所希望的保存名字輸入到每個柱監(jiān)視器的Username下。每一個收集瓶相應(yīng)的DNA序列標記用代碼代替。將每一個柱設(shè)置的詳細資料打印出來。對打印出來的資料進行檢查，判斷是否正確。
5、為了確保合成儀上合成柱處于正確的位置，運行StartColumn步驟對每一個柱的位置進行檢查。
6、對是否充滿連接在合成儀上的溶劑殘留(廢液瓶)進行檢查。
7、保證試管充分清潔干凈，保證DMT廢液管路通向分部收集器。
8、將循環(huán)啟動，運行開始程序?qū)υ噭┕苈愤M行清洗，將原來的試劑除去。
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