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常見的DNA基因合成儀的基本結構介紹

更新時間:2022-05-07      點擊次數:2435
  1、壓力系統(tǒng)
 
  一般地,DNA合成儀采用一定壓力的惰性氣體(氬氣)或氮氣及電磁閥組驅動液體試劑,也可采用氦氣驅動試劑。某些合成儀采用滑塊系統(tǒng)及精密蠕動泵,可不采用氣體為驅動系統(tǒng)。采用氣體及電磁閥驅動液體試劑時,需首先將管路系統(tǒng)電磁閥前段,含試劑瓶組中壓力加壓到規(guī)定氣壓,通過合成管理軟件或手動打開電磁閥(一般打開時間為數ms),即可驅動液體試劑到所需的合成柱中。
 
  2、試劑和溶劑儲液瓶
 
  DNA合成儀一般需堿基瓶組及試劑瓶組。試劑瓶組一般最少為6個,含脫保護劑(Deb)、活化劑(act)、蓋帽試劑A(capA)、蓋帽試劑B(capB)、氧化劑(OXI)及洗脫乙腈(ACN),每種儀器一般都多設置1-2個試劑瓶位,用于特殊產物的合成。堿基瓶組一般最少為4個標準堿基(A/C/G/T),同時搭配2-多個特殊堿基瓶位,用于熒光標記等合成。
 
  3、壓力管路及輸送管路
 
  DNA合成儀的一般原則需要保持內外氣體隔絕,因此無論試劑瓶、堿基瓶均需密封保持一定壓力。所有壓力管路目前均采用特氟龍導管,直徑為1/16—1/8吋。每個瓶子都有一個氬氣壓力管道及輸送管道進入瓶蓋插塞,對于亞磷酰胺,1—8號瓶其壓力管道也作為排氣管。氬氣管要保持在液體水平以上,而輸送管卻伸到瓶的底部。當閥門正確設置打開時,儲液瓶上部空間由氬氣加壓,液體被推進輸送管,流到其目的地。
 
  4、亞磷酰胺瓶排氣
 
  除了加壓外,亞磷酰胺瓶都是用壓力排氣管排氣的。把亞磷酰胺放人儀器前,要用氬氣排除空氣使其凈化。凈化是通過輸送管輸送氣體,當氣體輸送到瓶內時,空氣經壓力排氣管排出。這是由瓶子更換步驟自動完成的。廢液瓶是輸送系統(tǒng)的低壓側,必須將出口與大氣相通。要確保排氣管通到通風柜。如果排氣管阻塞,將會產生反壓,試劑和溶劑的輸送會受到抑制。
 
  5、輸送閥塊
 
  試劑輸送系統(tǒng)包括兩個試劑閥塊(8堿基儀器有3個)及2個或4個柱閥塊。閥塊控制氣體和化學試劑流人柱子及出口。除亞磷酰胺和四唑以外,試劑和溶劑都被同時輸送到所有活化柱。當有多個活化柱時,對流速的細微變化,以自動調節(jié)每個柱子的輸送次數來補償。每一個5—端口柱閥塊將流出物導人廢液口、DMT收集口,或DNA收集瓶,它也控制用于除去或沖洗柱內和柱閥塊內的試劑的氬氣。
 
  6、輔助真空
 
  對于閥塊的適當運行,關鍵是隔膜形成一個圓頂小空隙,每次電磁閥打開時,抽氣泵為每個閥塊提供了輔助真空,輔助真空在隔膜的螺線管一側形成,使隔膜形成一圓頂空隙。
 
  7、柱子
 
  起始結合在載體(一般為CPG)上的核苷酸是裝在一次性的柱子中,除柱體外,還有2個固定過濾板和2個接頭,所有的部件都由惰性材料制成。固定過濾板是多孑L性聚苯乙烯固定在兩端蓋子中。人口和出口都是母路厄氏(1uer)接頭,與儀器的公路厄氏接頭配對。柱子是對稱的(沒有頂端和底部、前后之分),可以以任何方式與公路厄氏接頭相連接。每一個柱子都用顏色編號,表示不同的起始核苷酸,以及有連續(xù)順序號碼。正常的流路是從底部進入,通過向上輸送液體,使CPG顆粒上升并保持懸浮狀態(tài)。溶劑和試劑的流速已經設置好,能使顆粒適當地混合。
 
  8、路節(jié)流閥
 
  試劑通過底部的接頭,流到柱子,如果沒擰上下面的一個接頭,應會在一個圓柱形的玻璃流路節(jié)流閥上發(fā)現。試劑通過流路節(jié)流閥中一個很小的通道流到柱子。小量的試劑可以在流路節(jié)流閥中結晶,長期這樣會造成流路阻塞。
 
  9、廢液和排氣
 
  大多數化學試劑輸送的最終點是廢液瓶,廢液瓶是一個空立著的聚苯乙烯容器,可放在合成儀附近的地板上或放在低于儀器的附近工作臺上。排氣管將廢氣導人適當的排氣裝置,如排煙罩。
 
  10、電導池
 
  電導流動池是為了測定在每個DNA合成循環(huán)內釋放的陽離子的總電導而設計的。流動池是由一空隙隔開的兩個電極組成,在空隙之間應用一小電壓。陽離子流過電導池時起電導作用。
 
  11、電池
 
  DNA合成儀一般帶有鋰電池,可以使用幾年。當主電源斷開時,所有的合成參數都被保留下來。這些參數包括儲存的DNA序列,用戶設定的循環(huán)、步驟和功能,以及瓶子使用資料等。如果正在合成中電源出現故障,合成將被中斷,只有主電源恢復時合成才可重新開始。電池還保持合成儀內部的時鐘計時。
 
  12、控制器
 
  控制器指導和初始合成儀的所有活動,它的主要部分是軟件、微處理機、顯示屏幕、鍵板及相關的電子部件。 昆山伯利克依托和憑借Biolytic美國強大的平臺技術支持,優(yōu)秀的產品、儀器、現場支持和安裝、服務,為我國市場制造和銷售先進的寡核苷酸合成儀及相關產品??筛鶕脩糇远x需求選擇更快速靈活的DNA基因合成儀。
 
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