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基因合成采用DNA合成儀可大幅縮短合成周期

發(fā)布時間:2022/3/30      點擊次數(shù):1454
   基因合成是指在體外人工合成雙鏈DNA分子的技術?;蚝铣墒怯萌斯し椒ê铣苫虻募夹g,是基因獲取的手段之一,相對于從已有生物中獲取基因來說,且合成無需模板,因而不受基因來源限制。
  基因合成的方法主要采用固相亞磷酰胺三酯法,運用此方法的DNA合成儀有很多,常用的有Dr.Oligo 48/96/192/384基因合成儀,可以按照自己的方式配置儀器,最多可配置42種試劑瓶位(4個單體,6個標準合成試劑和32個特殊單體)。
 
  基因合成采用基因合成儀的優(yōu)勢
  1、可以保證基因序列的*正確性,無突變;
  2、合成周期短;
  3、不受模板來源限制;
  4、根據(jù)不同應用,設計優(yōu)化基因序列,提高表達水平;
 
  基因合成方法
  為了在基因合成前使基因在不同的生物表達系統(tǒng)中良好表達,研究者通常對基因進行密碼子優(yōu)化。 雖然遺傳密碼有64種,但大部分生物傾向于利用這些密碼子的一部分,常用的叫做最佳密碼子,不常用的叫做稀有或利用率低的密碼子。
  實際用于蛋白質(zhì)表達或生產(chǎn)的生物(包括大腸桿菌、酵母、哺乳動物細胞、植物細胞、昆蟲細胞)均表現(xiàn)出一定程度的密碼子偏好性,因此重組蛋白質(zhì)的表達可能受到密碼子利用的影響(尤其是在異源表達系統(tǒng)中)。
  在不改變其編碼蛋白的情況下,修飾一個蛋白的編碼基因,去除稀有密碼子,合理優(yōu)化其mRNA二級結構、GC含量等過程稱為密碼子優(yōu)化。 密碼子優(yōu)化原理是根據(jù)所用表達系統(tǒng)的密碼子偏好性,對目標蛋白質(zhì)序列中的每個氨基酸選擇不同的密碼子進行全序列組合,找出其中較好的。

基因合成儀


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